七磷酸盐缓冲液(Hepes缓冲液)是一种常用的实验室缓冲液,广泛用于细胞培养和生物化学实验中。以下是配制七磷酸盐缓冲液的一般步骤:
材料
七水合磷酸氢二钠(Na2HPO4·7H2O)
磷酸二氢钠(NaH2PO4·H2O)
去离子水
pH计
烧杯或容量瓶
配制步骤
1. 计算所需物质的量:
根据所需缓冲液的体积和pH值,计算所需Na2HPO4·7H2O和NaH2PO4·H2O的物质的量。
公式:n = C × V,其中n是物质的量(摩尔),C是浓度(摩尔/升),V是体积(升)。
2. 称量:
根据计算结果,准确称量所需量的Na2HPO4·7H2O和NaH2PO4·H2O。
3. 溶解:
将称量好的Na2HPO4·7H2O和NaH2PO4·H2O加入去离子水中,充分搅拌直至完全溶解。
4. 调节pH值:
使用pH计监测溶液的pH值,根据需要调整至所需的pH值。通常七磷酸盐缓冲液的pH值范围在7.0到8.0之间。
可以通过滴加适量的酸(如HCl)或碱(如NaOH)来调节pH值。
5. 定容:
将调节好pH值的溶液转移到容量瓶中,用去离子水定容至所需体积。
6. 混匀:
盖紧容量瓶盖,充分混匀缓冲液。
7. 储存:
将配制好的七磷酸盐缓冲液储存于清洁、干燥的容器中,避免光照和高温。
注意事项
在配制过程中,应确保所有器皿都是清洁的,以免污染。
配制过程中避免吸入或接触化学物质,必要时佩戴防护用品。
配制好的缓冲液应在一定时间内使用,通常建议在配制后一周内使用完毕。
根据不同的实验需求,七磷酸盐缓冲液的配方和浓度可能会有所不同,请根据具体实验要求调整。